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一,、使用前的技術(shù)準(zhǔn)備
1. 上崗前的技術(shù)培訓(xùn):SFM— 2000L等發(fā)酵罐是機(jī)電一體化的設(shè)備,,因此;操作人員上崗前必須進(jìn)行技術(shù)培訓(xùn),,使他們熟悉整個(gè)系統(tǒng)的工作原理,、管路、閥門(mén)的操作程序,,并對(duì)空壓機(jī),蒸汽鍋爐,、變頻電機(jī)等設(shè)備,,能正確操作使用。未經(jīng)培訓(xùn)的人員,,不得單獨(dú)上崗操作,。
2. 設(shè)備使用之前,應(yīng)先檢查電源是否正常,,空壓機(jī),、微機(jī)控制系統(tǒng)、循環(huán)水系統(tǒng)是否能正常工作,。
3. 檢查系統(tǒng)上的閥門(mén),、接頭及緊固螺釘是否擰緊。
4. 開(kāi)動(dòng)空壓機(jī),,用0.15Mpa壓力,,檢查種子罐、發(fā)酵罐,、過(guò)濾器,、管路、閥門(mén)的密封性能是否良好,。
二,、空消
在投料前,氣路,、料路,、種子罐、發(fā)酵罐,、堿罐,、消泡罐必須用蒸汽進(jìn)行滅菌,消除所有死角的雜菌,,保證系統(tǒng)處于無(wú)菌狀態(tài),。
1. 空氣管路的空消
(1) 空氣管路上有三級(jí)預(yù)過(guò)濾器,,冷干機(jī)和除菌過(guò)濾器。預(yù)過(guò)濾器和冷干機(jī)不能用蒸汽滅菌,,因此在空氣管路通蒸汽前,,必須將通向預(yù)過(guò)濾器的閥門(mén)關(guān)閉,使蒸汽通過(guò)減壓閥,、蒸汽過(guò)濾器然后進(jìn)入除菌過(guò)濾器,。
2. 種子罐、發(fā)酵罐,、堿罐及消泡罐空消
(1) 種子罐,、發(fā)酵罐、堿罐及消泡罐是將蒸汽直接通入罐內(nèi)進(jìn)行空消,。
(2) 空消時(shí),,應(yīng)將罐上的接種口,排氣閥,,及料路閥門(mén)微微打開(kāi),,使蒸汽通過(guò)這些閥門(mén)排出,同時(shí)保持罐壓為0.13~0.15Mpa,。
(3) 空消時(shí)間為30~40分鐘,,特殊情況下,可采用間歇空消,。
三,、實(shí)消
實(shí)消是當(dāng)罐內(nèi)加入培養(yǎng)基后,用蒸汽對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的過(guò)程,,種子罐,、堿罐、消泡罐和發(fā)酵罐實(shí)消的操作過(guò)程相同,。
1. 空消結(jié)束后,,應(yīng)盡快將配好的培養(yǎng)基從加料口加入罐內(nèi),此時(shí)夾套內(nèi)應(yīng)無(wú)冷卻水,。
2. 培養(yǎng)基在進(jìn)罐之前,,應(yīng)先糊化,一般培養(yǎng)基的配方量以罐體全容積的70%左右計(jì)算(泡沫多的培養(yǎng)基為65%左右,,泡沫少的培養(yǎng)基可達(dá)75~80%),,考慮到冷凝水和接種量因素,加水量為罐體全容積的50%左右,,加水量的多少與培養(yǎng)基溫度和蒸汽壓力等因素有關(guān),,需在實(shí)踐中摸索。
3. 先開(kāi)啟機(jī)械攪拌裝置,,使罐內(nèi)物料均勻混合,,轉(zhuǎn)速50~100rpm,。
四、種子罐接種,、培養(yǎng)
1. 本設(shè)備采用火焰封口接種,,接種前應(yīng)事先準(zhǔn)備好酒精棉花、鉗子,、鑷子和接種環(huán),。
2. 菌種裝入三角燒瓶?jī)?nèi),接種量根據(jù)工藝要求確定,。
3. 將酒精棉花圍在接種口周?chē)c(diǎn)燃,,用鉗子或鐵棒擰開(kāi)接種口,此時(shí)應(yīng)向罐內(nèi)通氣,,使接種口有空氣排出,。
五、移種
1. 本設(shè)備采用壓差移種,,即在種子罐壓力大于發(fā)酵罐壓力的條件下將種子轉(zhuǎn)移到發(fā)酵罐內(nèi)。
2. 發(fā)酵罐經(jīng)實(shí)消冷卻到接種溫度后即可移種,。
3. 移種前,,對(duì)移種管路,閥門(mén)用蒸汽滅菌20分鐘,。
4. 移種時(shí),,種子罐保持0.08Mpa,發(fā)酵罐保持0.03Mpa,,打開(kāi)移種管路上的閥門(mén),,種子在壓差作用下,由種子罐轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐,。
六,、發(fā)酵罐的培養(yǎng)
1. 種子接入發(fā)酵罐后,即可進(jìn)行控溫培養(yǎng),,罐壓一般控制在0.05Mpa,,轉(zhuǎn)速根據(jù)各自工藝要求而定。
2. 發(fā)酵溫度根據(jù)工藝要求而定,,通過(guò)調(diào)節(jié)循環(huán)水的溫度來(lái)控制發(fā)酵溫度,,當(dāng)環(huán)境溫度高于發(fā)酵溫度時(shí),用冷水降溫,。
3. 發(fā)酵液的PH值是根據(jù)工藝要求而定,,當(dāng)需要調(diào)整PH值時(shí),逐步加入酸堿液,,直至所需PH值,。
4. 在發(fā)酵中途要取樣檢查時(shí),,可通過(guò)取樣口取樣。取樣前,,取樣管路閥門(mén)需用蒸汽滅菌,,防止雜菌污染而引起誤導(dǎo),取樣結(jié)束后同樣要用蒸汽沖洗取樣管道閥門(mén),。
七,、出料
1. 本設(shè)備的出料是利用罐壓將發(fā)酵液從出料管道排出,根據(jù)發(fā)酵液的濃度,,罐壓可控制在0.05~0.1Mpa,。
2. 出料后取出溶氧、PH儀,,進(jìn)行清洗保養(yǎng),。
八. 維修與保養(yǎng)
1. 安置設(shè)備的環(huán)境應(yīng)整潔、干燥,、通風(fēng)良好,,水、汽不得直接潑到電器上,。
2. 設(shè)備啟用之后,,必須及時(shí)清洗,防止發(fā)酵液干結(jié)在發(fā)酵罐及管路,、閥門(mén)內(nèi),。
3. 各類儀表,應(yīng)按規(guī)定要求保養(yǎng)存放 壓力表,、安全閥,、溫度儀每年應(yīng)校準(zhǔn)一次。
4. 設(shè)備停止使用時(shí)應(yīng)清洗,、吹干,。過(guò)濾器的濾芯應(yīng)取出清洗,涼干,,妥善保管,,法蘭壓緊螺母應(yīng)松開(kāi),防止密封圈永久變形,。
九. 特別注意事項(xiàng)
1. 在發(fā)酵過(guò)程中,,嚴(yán)禁將過(guò)濾器的排水閥突然打開(kāi)而引起發(fā)酵液倒流。
2. 當(dāng)突然停電時(shí),,應(yīng)迅速關(guān)閉發(fā)酵罐及空氣系統(tǒng)進(jìn),,排氣閥,保持罐壓和空氣系統(tǒng)不造成負(fù)壓。